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實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)耗材清單:從培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿/培養(yǎng)板的解析
實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)耗材全景解析
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的成功,始于對(duì)基礎(chǔ)耗材的深刻理解。正確的選擇不僅關(guān)乎細(xì)胞的健康生長(zhǎng),更直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。本文將系統(tǒng)性地解析從核心培養(yǎng)容器到輔助耗材的完整體系。
一、 核心培養(yǎng)容器:細(xì)胞的“家"
這類耗材是細(xì)胞直接生長(zhǎng)和增殖的場(chǎng)所,其選擇至關(guān)重要。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
功能:用于單層貼壁細(xì)胞的擴(kuò)增、傳代和維持培養(yǎng)。密封性好,不易污染,適合長(zhǎng)期培養(yǎng)。
關(guān)鍵選擇點(diǎn):
底部形狀:主要有直角方瓶(生長(zhǎng)面積大,空間利用率高)和三角搖瓶(常用于懸浮培養(yǎng),通氣性好)。
表面積:從25 cm2 (T25) 到225 cm2 (T225) 不等,T75是常用的規(guī)格。
瓶口設(shè)計(jì):豎口(傳統(tǒng),操作方便)、斜口(更易于移液器或刮刀伸入)、寬口(方便轉(zhuǎn)入組織塊)。
表面處理:TC處理(親水,適合貼壁細(xì)胞)和未處理(適合懸浮細(xì)胞)。
通氣性:密封蓋(普通培養(yǎng))、透氣蓋(內(nèi)置濾膜,可直接放入CO?培養(yǎng)箱,無(wú)需旋松瓶蓋)。
2. 細(xì)胞培養(yǎng)皿
功能:底部平坦開(kāi)闊,非常適合進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、克隆形成實(shí)驗(yàn)、免疫熒光染色、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)等。
關(guān)鍵選擇點(diǎn):
直徑:常見(jiàn)規(guī)格有35mm、60mm、100mm、150mm。
細(xì)胞培養(yǎng)板 vs. 培養(yǎng)皿:培養(yǎng)皿更“敞亮",適合需要頻繁開(kāi)蓋操作或顯微鏡觀察的實(shí)驗(yàn);培養(yǎng)板則更“集約",適合高通量實(shí)驗(yàn)。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)板
功能:高通量實(shí)驗(yàn)的利器。用于同時(shí)處理多個(gè)實(shí)驗(yàn)條件,如藥物篩選、細(xì)胞毒性測(cè)試、表型篩選、qPCR樣本準(zhǔn)備等。
關(guān)鍵選擇點(diǎn):
孔數(shù):
6孔板:常用,適合細(xì)胞傳代、擴(kuò)大培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、細(xì)胞劃痕等。
12孔板:中等通量,用途與6孔板類似。
24孔板:適合免疫細(xì)胞化學(xué)染色、中等通量藥物處理。
48孔板 & 96孔板:主要用于高通量藥物篩選、細(xì)胞增殖檢測(cè)(CCK-8, MTT)、ELISA。
384孔板 & 1536孔板:用于超高通量篩選和自動(dòng)化系統(tǒng)。
底部形狀:平底(常用)、圓底(適合懸浮細(xì)胞,如淋巴細(xì)胞收集)、V形底(用于細(xì)胞沉淀)。
表面處理:同培養(yǎng)瓶,分為TC處理和未處理。
二、 輔助與處理類耗材:操作的“左右手"
1. 移液類
血清移液管:一次性無(wú)菌,規(guī)格從1mL到25mL不等,用于培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)移和吹打細(xì)胞。是細(xì)胞培養(yǎng)的“筷子"和“勺子"。
巴氏吸管/滴管:塑料材質(zhì),用于轉(zhuǎn)移少量液體、吹散細(xì)胞團(tuán)塊。
微量移液器吸頭:必須無(wú)菌,用于精確移取微升級(jí)別的液體,如添加藥物、引物等。
2. 收集與儲(chǔ)存類
離心管:
錐底離心管(15mL, 50mL):用于細(xì)胞傳代時(shí)的重懸、洗滌、分裝。是細(xì)胞“洗澡和搬家"的臨時(shí)容器。
微量離心管(0.2mL, 0.5mL, 1.5mL, 2mL):用于儲(chǔ)存DNA、RNA、蛋白質(zhì)樣品,或配制小體積試劑。
凍存管:特殊設(shè)計(jì)的耐低溫管(如Nunc, Corning品牌),用于細(xì)胞長(zhǎng)期液氮凍存。密封性好,防止液氮滲入。
3. 分離與處理類
細(xì)胞刮刀:橡膠或塑料頭部,用于將貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)表面機(jī)械性地刮下來(lái)。可能對(duì)細(xì)胞損傷較大。
細(xì)胞篩:用于制備單細(xì)胞懸液,過(guò)濾掉細(xì)胞團(tuán)塊和組織碎屑,確保流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
三、 選擇耗材的核心考量因素
細(xì)胞類型:
貼壁細(xì)胞:必須選擇經(jīng)過(guò)TC處理(表面帶正電荷)的耗材。
懸浮細(xì)胞:選擇未經(jīng)TC處理的耗材,防止細(xì)胞貼壁。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br/>
擴(kuò)增/維持 → 培養(yǎng)瓶。
形態(tài)觀察/克隆形成 → 培養(yǎng)皿。
高通量/多條件 → 多孔培養(yǎng)板。
細(xì)胞凍存 → 凍存管。
通量與成本:
培養(yǎng)板效率高,但單位面積的成本也最高。需在通量和成本間取得平衡。
無(wú)菌性與質(zhì)量:
所有耗材必須無(wú)菌、無(wú)熱原、無(wú)細(xì)胞毒性。選擇信譽(yù)良好的品牌實(shí)驗(yàn)成功的基本保障。
四、 實(shí)用清單總結(jié)
最后建議:在開(kāi)始一項(xiàng)新實(shí)驗(yàn)前,花時(shí)間根據(jù)您的細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)方案,仔細(xì)規(guī)劃所需的耗材類型和數(shù)量,這將事半功倍,為您的科研之路奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
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